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注意三點,使用全自動核酸提取儀就沒有問題

發布時間:2021-08-05瀏覽:65次
   全自動核酸提取儀是專門用來提取核酸的儀器,面對紛繁復雜的樣本,每天的核酸提取可以說是費時費力。如果短時間內想穩定拿到實驗結果,那么快速、穩定的核酸提取方法就顯得十分重要。
 
  全自動核酸提取儀使用的比較常見的提取方法有沉淀法,離心柱法和磁珠法,提取步驟基本類似分為裂解、洗滌和洗脫。
 
  全自動核酸提取儀需要注意的細節較多,一處出錯都會導致結果的失敗。常見的問題主要有產物得率低,產物降解或者試劑殘留。針對這些問題,下文整理給出了具體的應對方法,幫助大家避坑。
 
  一、提取的核酸得率低:
 
  樣品量與試劑的配比要控制在一定范圍,避免超過裂解能力;
 
  破碎研磨的步驟處理細節很重要,一定要充分研磨,這是核酸提取的首要條件;
 
  在洗脫的步驟,使用足量的洗脫液洗脫并充分混勻,避免有團塊殘存;
 
  實驗耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也會影響核酸的得率。
 
  二、提取核酸出現降解:
 
  提取的樣品量要符合試劑的配比,盡量控制樣品量達到合適比例;
 
  每個步驟都要注意充分的混合均勻,避免團塊的殘留影響實驗結果;
 
  在洗脫時,時間過長或者溫度過高,核酸有可能會降解;
 
  樣本切記不可反復凍融,提取的樣本要注意在合適的溫度保存,長期保存盡量-80℃。
 
  三、提取到的核酸純度不夠高,甚至抑制物殘留影響下游實驗:
 
  樣本量和裂解液等試劑的配比要盡量控制到合適的范圍;
 
  混合均勻以確保裂解充分和沒有團塊殘留;
 
  晾干的步驟要充分,否則可能會導致醇類等雜質的殘留;
 
  磁棒振蕩幅度太小或混合時間太短,磁珠上有雜質殘留會影響磁珠吸附核酸的能力。

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