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有關數字PCR儀的系統組成,你真的了解了嗎?

發布時間:2021-06-11瀏覽:77次
   數字PCR儀就是利用DNA聚合酶對特定基因做體外或試管內InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶進行專一性的連鎖復制,被廣泛應用在生命科學研究、生化分析、臨床診斷、藥物分析、法醫鑒定和疫情快速檢驗等領域中。
  系統組成:
  數字PCR儀主要由兩部分組成,一個是PCR系統,一個是熒光檢測系統。由于定量PCR必需借助樣本和標準品之間的對比來實現定量的,對于定量PCR系統來說,重要的參數除了傳統PCR的溫控精確性、升降溫速度等等,更重要的還在于樣品孔之間的均一性,以避免微小的差別被指數級放大。
  至于熒光檢測系統,多色多通道檢測是當今的主流趨勢,儀器的激發通道越多,儀器適用的熒光素種類越多,儀器適用范圍就越寬;多通道指可同時檢測一個樣品中的多種熒光,儀器就可以同時檢測單管內多模版或者內標+樣品,通道越多,儀器適用范圍越寬、性能就更強大。
  熒光檢測系統主要包括激發光源和檢測器。激發光源有鹵鎢燈光源、氬離子激光器、發光二極管LED光源,前者可配多色濾光鏡實現不同激發波長,而單色發光二極管LED價格低、能耗少、壽命長,不過因為是單色,需要不同的LED才能更好地實現不同激發波長。監測系統有超低溫CCD成像系統和PMT光電倍增管,前者可以一次對多點成像,后者靈敏度高但一次只能掃描一個樣品,需要通過逐個掃描實現多樣品檢測,對于大量樣品來說需要較長的時間。數字PCR儀需要考慮的另外一個因素是軟件設計,這一點目前較新型號的儀器都有不錯的配套軟件可以滿足常規使用。

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