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淺析PCR儀正確的清洗方法

發布時間:2021-05-26瀏覽:89次
  PCR儀可標記有熒光素的探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,低溫復性,適溫延伸的熱循環,并遵守聚合酶鏈反應規律,與模板DNA互補配對的探針被切斷,熒光素游離于反應體系中,在特定光激發下發出熒光,隨著循環次數的增加,被擴增的目的基因片段呈指數規律增長,通過實時檢測與之對應的隨擴增而變化熒光信號強度,求得CT值,同時利用數個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數。
  PCR儀的PCR反應過程的關鍵是升、降溫過程的時間控制,要求越短越好,當PCR儀的降溫過程超過60s,就應該檢查儀器的制冷系統,對風冷制冷的PCR儀要較徹底地清理反應底座的灰塵;對其他制冷系統應檢查相關的制冷部件。
  PCR儀清洗:
  1.樣品池的清洗
  先打開蓋子,后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,然后清洗被污染的孔;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體;打開PCR儀,設定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發去除。一般5~10min即可。
  2.熱蓋的清洗
  對于PCR儀當有熒光污染出現,而且這一污染并非來自樣品池時;或當有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔鏡干凈,無污物阻擋光路。
  3.PCR儀外表面的清洗
  清洗儀器的外表面可以除去灰塵和油脂,但達不到消毒的效果。選擇沒有腐蝕性的清洗劑對PCR儀的外表面進行清洗。

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